全自動蛋白轉膜儀是一種用于將蛋白質從聚丙烯酰胺凝膠高效轉移到膜（如PVDF膜或硝酸纖維素膜）上的實驗儀器，廣泛應用于Western Blot等分子生物學實驗中。相較傳統(tǒng)的半干式或濕轉方式，全自動蛋白轉膜儀操作更簡便，轉印速度更快，尤其適用于高通量實驗場景。那么，如何正確使用全自動蛋白轉膜儀？以下為標準操作流程及關鍵注意事項。

一、準備工作

樣品電泳：首先完成SDS-PAGE電泳步驟，分離目標蛋白。

預處理膜和凝膠：如使用PVDF膜，需先在甲醇中浸泡1分鐘活化，再轉入轉印緩沖液中；凝膠則需用轉印緩沖液充分平衡，通常需浸泡5–10分鐘。

準備轉印緩沖液：可使用設備配套的高效快速轉膜緩沖液母液稀釋配制，按推薦比例配制所需體積。

二、組裝轉印夾層（轉印“夾心”）

轉印“夾心”結構從陽極到陰極一般為：

陽極板 → 濾紙 → 膜 → 凝膠 → 濾紙 → 陰極板。

操作時需確保膜與凝膠之間貼合緊密、無氣泡，可使用玻璃棒或移液槍輕壓排氣。

三、設置轉印條件

開機操作：開啟全自動蛋白轉膜儀，進入主界面。

程序設定：可通過7寸液晶觸摸屏輸入轉印參數(shù)，如電壓、時間及電流強度等。常見參考參數(shù)為：

分子量 ≤ 70 kDa：25V，7分鐘

分子量 ≤ 100 kDa：25V，10分鐘

分子量 ≤ 180 kDa：25V，15分鐘

程序調用：儀器支持最多保存25組自定義運行程序，用戶可直接調用已有設置，避免重復操作。

四、啟動轉印并監(jiān)控過程

啟動設備后，系統(tǒng)將自動控制電流并執(zhí)行設定的轉印程序。運行過程中，屏幕會實時顯示轉印狀態(tài)，包括電壓、電流和剩余時間等，便于實驗者監(jiān)控。

五、取出膜并后續(xù)處理

轉印完成后，打開轉印模塊，取出膜。此時蛋白已由凝膠成功轉移至膜表面，可繼續(xù)進行封閉、抗體孵育、顯色或化學發(fā)光等后續(xù)步驟。

六、注意事項

確保膜與凝膠大小一致，并準確對齊。

所有耗材（濾紙、膜）需充分浸潤在緩沖液中，避免干燥引起轉印不完全。

轉印前檢查設備接觸良好，避免電極連接異常導致效率下降。

不建議超過推薦時間，以免小分子蛋白穿膜或背景增高。

結語

全自動蛋白轉膜儀通過集成式設計和自動化控制，簡化了蛋白轉印流程。只需按步驟完成準備、設定和運行，便可在短時間內獲得高質量轉印結果，是現(xiàn)代分子實驗室提高效率、保障數(shù)據(jù)一致性的理想選擇。